Жаңалықтар

Javascript қазір браузеріңізде өшірілген.JavaScript өшірілген болса, бұл веб-сайттың кейбір мүмкіндіктері жұмыс істемейді.
Өзіңіздің нақты мәліметтеріңізді және сізді қызықтыратын дәрі-дәрмекті тіркеңіз, біз сіз берген ақпаратты біздің кең дерекқорымыздағы мақалалармен сәйкестендіреміз және сізге PDF көшірмесін дереу электрондық пошта арқылы жібереміз.
Дин Цзиньну, Чжао Вэйфэн, жұқпалы аурулар бөлімі, Сучжоу университетінің бірінші еншілес ауруханасы, Сучжоу қаласы, Цзянсу провинциясы, 215000 Тел.ас қорыту жүйесінің ісіктері 5 жылдық жалпы өмір сүру ұзақтығы 14,1%.HCC-мен ауыратын көптеген пациенттер озық сатысында диагноз қойылады, сондықтан HCC өлімін азайту үшін ерте скрининг маңызды болып табылады.Қан сарысуындағы альфа-фетопротеин (AFP), линза лектин-реактивті альфа-фетопротеин (AFP-L3) және қалыптан тыс протромбин (К витаминінің тапшылығынан туындаған II, PIVKA-II ақуызы) сияқты жиі қолданылатын анықтау көрсеткіштеріне қосымша, сұйықтық биопсиясы әдістері Оның HCC анықтауда диагностикалық маңызы бар екені көрсетілді.Инвазиялық процедуралармен салыстырғанда сұйықтық биопсиясы айналымдағы қатерлі метаболиттерді анықтай алады.Сұйықтық биопсиясы әдістері айналымдағы ісік жасушаларын, айналымдағы ісік ДНҚ-сын, айналымдағы РНҚ және экзосомаларды анықтайды және HCC ерте скрининг, диагностика және болжамды бағалау үшін қолданылады.Бұл мақалада молекулалық биология және жоғары қауіпті HCC топтарының ерте скринингін жақсарту үшін HCC ерте бағалаудың өміршең нұсқалары болуы мүмкін перспективалы биомаркерлерді оқшаулау үшін әртүрлі сұйықтық биопсиясы әдістерін қолдану қарастырылады.Түйінді сөздер: сұйықтық биопсиясы әдісі, гепатоцеллюлярлық карцинома, жоғары тәуекел тобы.
Гепатоцеллюлярлық карцинома (ГСС) ас қорыту жолдарының кең таралған қатерлі ісігі болып табылады, ерлер де, әйелдер де қатерлі ісіктердің жаңа жағдайлары арасында алтыншы орында.1 Бүкіл әлемде бауыр обыры қатерлі ісік ауруынан өлім-жітімнің өкпе және тоқ ішек обырынан кейінгі үшінші себебі болып табылады, бұл барлық қатерлі ісіктерден болатын қатерлі ісікке байланысты өлімнің 8,3%-ын құрайды.1 HCC болжамы диагноз қойылған кезеңмен тығыз байланысты.HCC нашар өмір сүрудің негізгі себептері - бауырішілік метастаздар, портальді веноздық ісік тромбалары және резекцияны болдырмайтын алыстағы метастаздар және бұл сипаттамалардың көпшілігі диагноз қойылған кезде пациенттерде бар.
Диагностикалық және емдеу нұсқауларына сүйене отырып, СГК дамуының негізгі қауіп факторлары бауыр циррозы, созылмалы гепатит В вирусы (HBV) немесе гепатит С вирусы (HCV) инфекциясы, алкогольдік майлы бауыр ауруы және алкогольсіз майлы бауыр ауруы (NAFLD) болып табылады. ).2 Сонымен қатар, HCC үшін қауіп факторларына афлатоксинмен ластанған тағамды қабылдау, шистосомоз, цирроздың басқа себептері, бауыр обыры, қант диабеті, семіздік, темекі шегу және есірткінің әсерінен болатын бауыр жарақаттары жатады.35 және 45 жастағы жоғары тәуекел топтары үнемі медициналық тексеруден өтуі керек.Ерте скрининг HCC бар науқастардың жалпы өмір сүруін жақсарту үшін маңызды ерте емдеу стратегиясы болып табылады.
HCC3,4 ерте скрининг үшін AFP, AFP-L3 және PIVKA-II сияқты биомаркерлер ұсынылады.Сұйық биопсия әдістері ерте диагностика мен емдеуді бағалауда перспективалы нәтижелер көрсетті.5,6 AFP сияқты жиі қолданылатын сарысу маркерлеріне қарағанда жоғары сезімталдық пен спецификалық болуы мүмкін HCC сұйық биопсиясында айтарлықтай прогреске қол жеткізілді (1-кесте).
AFP HCC-де кеңінен қолданылатын биомаркер және қазіргі уақытта аурудың ерте скринингі, диагностикасы және бағалауы үшін кеңінен қолданылатын ең егжей-тегжейлі биомаркер болып табылады.AFP деңгейінің тұрақты жоғарылауы HCC прогрессінің қауіп факторы болып саналады.7,8 Кіші гепатоцеллюлярлық карциноманы (sHCC) анықтау жылдамдығы ультрадыбыстық және компьютерлік томографияның дамуымен артып келеді және AFP клиникалық тәжірибеде hHCC анықтауға ерекше сезімтал емес екені анықталды.Ретроспективті көп орталықты зерттеу9 сәйкес AFP оң HCC жағдайларының 46% (616/1338) және sHCC жағдайларының 23,4% (150/641) анықталды.Сонымен қатар, созылмалы бауыр ауруы және циррозы бар науқастарда AFP деңгейі жоғарылайды.10 Осылайша, AFP sHCC үшін шектеулі скринингтік әсерге ие.11 Азия-Тынық мұхиты елдерінің гепатоцеллюлярлық карциномаға арналған клиникалық практикалық нұсқаулықтарына сәйкес, AFP қолдану ұсынылмайды.12 Клиникалық дәлелдемелер HCC емдеуде PIVKA-II AFP-ден жоғары екенін және PIVKA-II мен AFP комбинациясы бар екенін көрсетеді. HCC диагностикалық мәні жоғары.13 Тіндердің биопсиясымен салыстырғанда, сұйықтық биопсиясы ең алдымен дене сұйықтықтарындағы (қан, сілекей, плевралық сұйықтық, цереброспинальды сұйықтық немесе несеп) ісікпен байланысты метаболиттерді анықтайды және тіндерге аз инвазивті.14 Сонымен қатар, сұйық биопсиялар бастапқы ісік тінінде жоқ қатерлі белгілерді көрсетуі мүмкін.15 Сұйық биопсия ісіктердің барлық түрлеріне клиникалық тәжірибеде әлі тексерілмейді, бірақ олардың қатерлі ісік кезіндегі диагностикалық әлеуеті онкологтардың назарын аударуда.16 Сұйықтық биопсиясы айналымдағы ісік жасушаларын (КТК), айналымдағы ісік ДНҚ (cDNA), айналымдағы бос РНҚ (ecRNA) және экзосомаларды анықтай алады.Бұл мақалада біз жоғары қауіпті HCC топтарының ерте скринингіндегі сұйықтық биопсиясының әртүрлі әдістерінің сипаттамаларын, рөлін және қолданылуын талқылаймыз.
Сау адамдардан алынған қан үлгілеріндегі жасушадан тыс ДНҚ (cfDNA) алғаш рет 1948 жылы Мандел және т.б.17 cfDNA ұзындығы шамамен 160–180 бит болатын жасушасыз ДНҚ фрагменті, негізінен лимфоциттер мен миелоидты жасушалардан шыққан.ctDNA – ісік жасушалары шеткергі қанға шығаратын ерекше мутант ДНҚ фрагменті, ол некроз, апоптоз және экскрецияны қоса алғанда, белгілі бір патофизиологиялық процестерден кейін ісік жасушаларының геномдық ақпаратын білдіреді.Жалпы cfDNA-дағы ктДНҚ үлесі ісік түріне байланысты кеңінен өзгереді және cDNA фрагменттерінің ұзындығы әдетте 167 бит-тен аз болатыны хабарланады.18 Андерхиллдің зерттеуі cfDNA фрагменттері әдетте қалыпты cfDNA-дан қысқа екенін көрсетті.19 Дені сау адамдармен салыстырғанда, онкологиялық науқастардың қанындағы cfDNA фрагменттерінің жалпы ұзындығы қысқарақ, сондықтан cfDNA ісіктерді ерте скринингтің көрсеткіші ретінде пайдалануға болады.cfDNA фрагментінің ұзындықтарының кейбір ішкі жиындарын байыту метастаздық емес қатты ісіктермен байланысты cDNA анықтауды жақсарта алады.Зерттеулер көрсеткендей, ctDNA асқынған ұйқы безі, тоқ ішек, қуық, асқазан-ішек, бауыр, аналық без, сүт безі, меланома және бас және мойын ісіктерінің 75% -дан астамында кездеседі.20,21 Алайда қандағы ктДНҚ мөлшері ісіктің орналасуына байланысты.22 Беттегуд жүргізген зерттеуде колоректальды, сүт безі, бауыр, өкпе және простата обыры бар науқастардың қанында басқа қатерлі ісікке қарағанда cDNA деңгейі жоғары екені анықталды.Керісінше, ауыз қуысының қатерлі ісігі, ұйқы безінің қатерлі ісігі, асқазан обыры және глиома бар науқастарда қандағы cDNA концентрациясы төмен болды.жиырма бір
ctDNA бастапқы ісік жасушаларымен бірдей генетикалық мутацияларды қамтитындықтан, cDNA гетерогенді ісікке спецификалық мутацияларды және эпигенетикалық өзгерістерді, соның ішінде метилденуді, гидроксиметиляцияны, бір нуклеотидтік вариацияларды және көшіру санының вариацияларын анықтау үшін пайдаланылуы мүмкін.жиырма үш
ДНҚ метилденуі гендік репрессияға әкелетін ең көп таралған эпигенетикалық өзгерістердің бірі болып табылады.Қалыпты жасушалармен салыстырғанда, ісік жасушаларының геномының жалпы метилдену деңгейінде, әсіресе ісік супрессоры гендерінің метилденуінде айырмашылықтар бар, оларды ерте кезеңде анықтауға болады, бұл ДНҚ метилденуінің өзгеруі ерте кезеңнің көрсеткіші болуы мүмкін деп болжайды. ісік пайда болуын анықтау.HCC-мен байланысты ісік супрессоры гендер промоторлық метилдену арқылы инактивациялануы мүмкін, осылайша ісік пайда болуын ынталандырады.24 ДНҚ метилденуі тіндік ерекшелігіне, анықталуына және жасқа тәуелсіздігіне байланысты ісіктерді ерте диагностикалау үшін тамаша маркер болып табылады.Сонымен қатар, ДНҚ метилденуі соматикалық мутациялармен салыстырғанда жиі кездеседі, өйткені мақсатты геномның әр аймағында мақсатты аймақтар және бірнеше өзгертілген CpG учаскелері бар.25 Бірнеше CpG сайттарынан басқа, DBX2, THY1, MT1M, INK4A, VIM, FBLN1 және RGS10.26 Xu және т.б.-да ctDNA-дағы тәуелсіз гиперметилденген локустардың үлкен саны анықталды.1098 HCC пациентінен және 835 сау бақылаудан алынған cfDNA үлгілерін салыстыру HCC-мен байланысты гендердің сәйкес плазмалық кДНҚ метилдену белгілерімен қатты корреляциясы анықталды.25 Зертханалық талдау негізінде сәйкесінше 85,7% және 94,3% сезімталдығы мен ерекшелігі бар 10 метилдену маркерін қамтитын болжамды модель әзірленді және бұл маркерлер ісік массасымен, ісік сатысымен және емге жауаппен жоғары корреляцияға ие болды.Бұл нәтижелер cDNA метилдену маркерлерін пайдалану HCC диагностикасында, мониторингінде және болжамында үлкен үміт бар екенін көрсетеді.Lu et al27 ұсынған үш аберрантты метилденген гендерден (APC, COX2, RASSF1A) және бір miRNA (miR203) тұратын метилдеу үлгісінде HBV-ассоциацияланған HCC диагностикасы үшін 27-үлгінің сезімталдығы мен ерекшелігі салыстырмалы болды.80%.Сонымен қатар, модель AFP деңгейі 20 нг/мл болатын диагностикаланбаған HCC пациенттерінің 75% анықтай алады.Рас-ассоциацияланған домендік отбасы 1A ақуызының гені (RASSF1A) адам геномындағы негізгі қайталанатын ДНҚ тізбегі болып табылады.Арауджо және т.б.RASSF1A промоторының гиперметилденуі HCC ерте скринингі үшін құнды биомаркер және эпигенетикалық терапия үшін әлеуетті молекулалық мақсат болуы мүмкін деген қорытындыға келді.28 Бір зерттеуде қан сарысуындағы RASSF1A промоторының гиперметиляциясы HCC бар науқастардың 73,3% -ында анықталды.29 Ұзын аралықтағы нуклеотидті элемент 1 (LINE-1) тағы бір жоғары белсенді ретротранспозиция медиаторы болып табылады.LINE-1 гипометиляциясы HCC сарысу үлгілерінің 66,7% ДНҚ-да табылды және радикалды резекциядан кейін ерте рецидивпен және нашар өмір сүрумен байланысты болды.29 Гиперметиляция – бауыр циррозы мен HCC дамуында ерекше рөл атқаратын кең таралған генетикалық процесс.30 Керісінше, гидроксиметиляция геннің реактивациясын және экспрессиясын тудыратын деметилдену процесі болып табылады және бұл процесте 5-гидроксиметилцитозин (5-hmC) өнімін анықтау ісіктерді анықтау үшін пайдаланылуы мүмкін.cDNA-ның метилденуі және гидроксиметилденуі ісік пайда болуымен байланысты және HCC ерте скринингіне ықпал етуі мүмкін.2554 субъектіні зерттеуде cfDNA үлгілерінен 31 геномдық 5-hmC табылды және HCC пациенттерінде және созылмалы аурулары бар адамдар сияқты жоғары тәуекел топтарында 5-hmC тізбегін салыстыру арқылы 32 ген анықталды.Бауыр ауруларының диагностикалық үлгілері.және цирроз.Бұл модель HCC ісік емес тіннен ажыратуда AFP-ден жоғары болды.
Кодтау аймақтарындағы мутациялар транскрипциялық ауытқуларға әкелуі мүмкін, бұл ақуыз тізбегінің өзгеруіне және ақыр соңында қатерлі ісікке әкелуі мүмкін.Бір нуклеотидтік нұсқалар тіндердің жоғары сенімділігіне және ісік пен тіндердің жоғары ерекшелігіне байланысты ісіктерді ерте скрининг үшін маңызды геномдық маркерлер болып табылады.Қатерлі ісіктің экзомасы мен тұтас геномының секвенциясы үшін келесі ұрпақ секвенциясын (NGS) қолданатын көптеген HCC-ке қатысты зерттеулер TP53 және CTNNB1 сияқты жалпы мутацияланған жасушалық гендерді, сондай-ақ ARID1A, MLL, IRF2 сияқты бірнешеуін анықтады.Жаңа гендер, ATM, CDKN2A, FGF19, PIK3CA, RPS6KA3 және JAK1 қалыпты мутация жылдамдығын көрсетеді. Мутантты ген функциясының талдауы хроматинді қайта құрудағы, Wnt/β-катенин мен JAK/STAT сигналының берілісіндегі, P53-жасуша циклінің жолындағы, эпигенетикалық модификаторлардағы, тотығу стресс жолдарының, PI3K/AKT/MTOR жолындағы және RAS/RAF/ өзгерістерінің болуын болжайды. MAPK киназа жолы HCC онкогенезінде шешуші рөл атқарады.32,33 Ісікпен байланысты мутациялар анықталған зерттеуде Хуан және басқалары ctDNA-ға тәуелді ісікпен байланысты мутациялардың жиілігі 19,5%, ал ерекшелігі 90% екенін анықтады. .34 Сонымен қатар, тамырлы инвазияны бастан өткерген пациенттерде ктДНҚ мутациялары (P=0,041) және қайталанусыз өмір сүру ұзақтығы (P<0,001) болуы ықтимал. Мутантты ген функциясының талдауы хроматинді қайта құрудағы, Wnt/β-катенин мен JAK/STAT сигналының берілісіндегі, P53-жасуша циклінің жолындағы, эпигенетикалық модификаторлардағы, тотығу стресс жолдарының, PI3K/AKT/MTOR жолындағы және RAS/RAF/ өзгерістерінің болуын болжайды. MAPK киназа жолы HCC онкогенезінде шешуші рөл атқарады.32,33 Ісікпен байланысты мутациялар анықталған зерттеуде Хуан және басқалары ctDNA-ға тәуелді ісікпен байланысты мутациялардың жиілігі 19,5%, ал ерекшелігі 90% екенін анықтады. .34 Сонымен қатар, тамырлы инвазияны бастан өткерген пациенттерде ктДНҚ мутациялары (P=0,041) және қайталанусыз өмір сүру ұзақтығы (P<0,001) болуы ықтимал.Мутантты ген функциясының талдауы хроматинді қайта құрудағы, Wnt/β-катенин және JAK/STAT сигнализациясындағы, P53 жасушалық цикл жолындағы, эпигенетикалық модификаторлардағы, тотығу стресс жолдарының, PI3K/AKT/MTOR жолындағы және RAS/RAF/MAPK киназа жолындағы өзгерістердің ойнайтынын көрсетеді. HCC ісіктерінің маңызды рөлі.32,33 Ісікпен байланысты мутацияларды тапқан зерттеуде Хуан және т.б.ctDNA-тәуелді ісікпен байланысты мутациялардың жиілігі 19,5% және ерекшелігі 90% екенін анықтады..34 Кроме того, сіз пациенттердің сосудистой инвазиясы кезінде встречались мутации цДНК (P=0,041) және более короткая безрецидивная выживаемость (P<0,001). .34 Сонымен қатар, тамырлы инвазиясы бар науқастарда cDNA мутациялары көбірек болды (P=0,041) және аурусыз өмір сүру ұзақтығы (P<0,001).Мутантты гендердің функционалдық талдауы хроматиннің қайта құрылуын, Wnt/β-катенин және JAK/STAT сигнализациясын, P53 жасушалық цикл жолын, эпигенетикалық модификаторларды, тотығу стресс жолын, PI3K/AKT/MTOR жолын және RAS/RAF/MAPK жолын анықтады. HCC онкогенезінде киназалық жол маңызды рөл атқарады. 32,33 一在 一 项肿瘤 肿瘤肿瘤 到肿瘤 相关肿瘤突变中, Huang 等 人 人人 中研究中 中中 中发现 中发现 突变 突变肿瘤 突变突变 突变 突变突变 突变 突变突变 突变 突变 突变 突变 突变 依赖于 突变 依赖于 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 19,5%, 特异性 为 90%, 特异性 为 90%, 特异性特异性 90%, 经历 血管 侵犯 的 患者 患者患者 更更 可能更突变（P=0,041）和更短的无复发生存期（P<0,001）。 32.33 一 一在 项相关 相关 到突变 相关突变 突变 的 的 的的, Huang 等 发现发现 肿瘤发现 相关 依赖于相关 依赖于相关 依赖于 依赖于 依赖于 依赖于 依赖于 依赖于 的 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 经历 经历 血管 血管 血管 血管 血管 侵犯 侵犯 侵犯 的 的 的 的 更 可能 更 更 更 更 可能 更 更 更 更 更 更 更 更 更 更 (p = 0.041) 和 (p = 0.041) 和和短的无复发生存期（P<0,001）。32,33 Ісікпен байланысты мутацияларды анықтаған зерттеуде Хуан және т.б.ісікпен байланысты мутациялардың 19,5% спецификасы 90% кДНҚ-ға тәуелді екенін анықтады 34. Сонымен қатар, қан тамырлары инвазиясынан өткен науқастарда кДНҚ дамуы ықтималдығы жоғары болды.мутация (P = 0,041) и более короткая безрецидивная выживаемость (P <0,001). мутация (P=0,041) және аурусыз өмір сүру ұзақтығы (P<0,001).Басқа кең таралған HCC драйвер гені TP53 болып табылады, оның мутация жылдамдығы 30%-дан асады.Зерттеулер қан мен зәрдегі ctDNA-дағы TP53 мутациясының жиілігі 5%-дан 60%-ға дейін болатынын көрсетті.35 Йоханның зерттеуі соңғы HCC-тегі ctDNA мутация спектрінің ерте ГСС-ге ұқсас мутация жылдамдығына ие екенін көрсетті, соның ішінде TERT промоторы (51%), TP53 (32%), CTNNB1 (17%), PTEN (8%), мутациялар. AXIN1., ARID2, KMT2D және TSC2 (әрқайсысы 6%).36 β-катенин (CTNNB1) онкогені Wnt сигнал беру жолында маңызды рөл атқарады.CTNNB1 транскрипциялық коактиваторы жасуша пролиферациясына, апоптоздың тежелуіне және ангиогенезге әкелуі мүмкін ген экспрессиясына ықпал ете алады.CTNNB1 сонымен қатар гепатоциттердің трансформациясын индукциялау үшін TERT-пен әрекеттесе алады.33 TERT промоторы кейбір қатты ісіктерде жиі мутацияға ұшырайды.HCC қатерлі трансформациясындағы ең ерте генетикалық өзгерістердің бірі болып табылатын TERT өзгерістері цирротикалық гепатоциттерде теломераза реактивациясына әкелуі мүмкін және пролиферацияға ықпал етуі және қартаюдың алдын алуы мүмкін.33-37 TERT промоторындағы мутациялар бауырдың пролиферативті түйіндері және ерте HCC бар емделушілердің 59-90%-да орын алатыны және өмір сүрумен байланысты екені хабарланды.38
Көшірме санының өзгеруі (CNA) соматикалық мутациялардың маңызды қосалқы түрі болып табылады.Зерттеулер CNA-ның кең таралған және фокалды ауыртпалығы ісіктің иммундық инфильтрациясын және қатерлі ісіктің кейбір түрлерінде алып тастауды болжауға қабілетті геномдық белгі екенін көрсетті.39 Белсенді инфильтрация сигналы, жоғары цитолитикалық белсенділік, ауыр қабыну және HCC антигенді ұсынумен байланысты генетикалық маркерлер.477 субъектідегі жалғыз нуклеотидтік полиморфизмдер деректер массивін талдау ОЖЖ-ға төмен жүктемені анықтады.Керісінше, жоғары ауқымды CNA жүктемесі бар хромосомалық тұрақсыз ісіктер иммундық қабылдамау белгілерін көрсетті және пролиферациямен, ДНҚ жөндеуімен және TP53 дисфункциясымен байланысты болды.Сю т.б.HCC тобының созылмалы бауыр аурулары тобына қарағанда CNA ұпайлары жоғары екенін көрсетті.40 Бір жасушаның толық геномдық секвенциясын пайдалана отырып, CNA гепатокарциногенездің басында пайда болатыны және ісік прогрессиясы кезінде салыстырмалы түрде тұрақты болып қалатыны анықталды.41 Чунг және т.б.HCC пациенттерінде cfDNA деңгейлері айтарлықтай жоғарылағанын және cfDNA-дағы геномдық CNAs сорафенибпен емделген HCC пациенттерінде маңызды тәуелсіз болжамдық маркер екенін анықтады.42 CNA жүктемесі жоғары науқастарда CNA жүктемесі төмен науқастарға қарағанда аурудың өршуі және өлім ықтималдығы жоғары болды.Оллерих және т.б.Көшірме санының тұрақсыздығы индексі (CNI) онкологиялық науқастардың cfDNA-да CNA бағалау үшін пайдаланылуы мүмкін екенін анықтады.Олар қатерлі ісікке шалдыққан науқастардың жүйелі химиотерапия мен иммунотерапияға реакциясын бағалайтын бақылау тобына қарағанда CNI көрсеткіштері айтарлықтай жоғары екенін атап өтті.43 Бұл нәтижелер сұйық биопсия үлгілерінде табылған CNAs дамыған қатерлі ісік бар емделушілерде болжамдық көрсеткіштер ретінде қызмет етуі мүмкін екенін көрсетеді.Жүйелі терапия фонындағы HCC.
Қазіргі уақытта ctDNA анықтау үшін қолданылатын әдістерді мақсатты және мақсатты емес әдістерге бөлуге болады.Қысқаша айтқанда, цифрлық полимеразды тізбекті реакция (dPCR), BEAMing цифрлық ПТР, күшейту рефрактерлі мутация жүйесі-ПТР, Capp-Seq және Tam-Seq сияқты мақсатты әдістер алдын ала анықталған гендерге өте сезімтал.Тұтас геномды реттілік және NGS сияқты мақсаттан тыс әдістер бүкіл геномдық ландшафттың жан-жақты көрінісін қамтамасыз етеді.44 Мақсатты панельдермен салыстырғанда, тұтас геномды реттілік тек нүктелік мутациялар мен кірістірулерді ғана емес, сонымен қатар қайта реттеулерді және көшіру санының вариацияларын да анықтай алады.болжам, ал CTC және cfDNA HCC динамикалық мониторингі үшін пайдаланылуы мүмкін жақсы көрсеткіштер болып табылады.45 Сонымен қатар, cfDNA талдауы HCC анықтауда пайдалырақ болуы мүмкін.Ян және т.б.HCC бар науқастардың плазмасындағы cfDNA бауыр фиброзы бар емделушілерге және дені сау бақылауларға қарағанда айтарлықтай жоғары екенін көрсетті.AFP-мен салыстырғанда, ctDNA ерте HCC үшін жақсы скринингтік маркер болады деп күтілуде.46 Популяция популяциясында cfDNA және ақуызды сынайтын 47 сұйық биопсияның перспективалық зерттеуінде олардың HCC бар науқастарды HCC жоқ пациенттерден ажыратуда тиімді екендігі көрсетілді.331 ультрадыбыстық зерттеу қалыпты және AFP-теріс пациенттерді бақылауда HCC диагностикасы үшін cfDNA сезімталдығы мен ерекшелігі сәйкесінше 100% және 94% құрады, сондықтан cDNA симптомсыз HBsAg серопозитивті адамдарда HCC анықтай алады.Yeo48 зерттеуінде HCC бар науқастарда RASSF1A промоторының гиперметиляциясының жоғары жиілігі (92,5%) анықталды.Сонымен қатар, Xu et al.тиісінше 90,5% және 83,3% спецификалық метилдену маркерлерінің панелін пайдалана отырып, HCC болжаудың диагностикалық моделін жасады.Панель HCC бар науқастарды басқа бауыр аурулары бар науқастардан ажыратуға мүмкіндік береді, бұл AFP қарағанда жақсы.Олар сондай-ақ оң нәтиже берген қалыпты бақылауда HBV инфекциясы немесе алкогольді қолдану тарихы сияқты HCC үшін қауіп факторлары болуы мүмкін екенін анықтады.25 Біз HCC үшін жоғары тәуекел факторлары cfDNA гиперметиляциясына ықпал етуі мүмкін деп болжаймыз, ол кейіннен HCC прогрессиясына ықпал етеді және осылайша cfDNA жоғары тәуекел топтарын скринингте шешуші рөл атқаруы мүмкін.Cai және т.б.ctDNA мутацияларының толық ауқымын қорытындылаңыз және пациенттердегі ісік жүктемесін бағалаудың сенімді стратегиясын ұсыныңыз.49 Бұл стратегия визуалды өзгертуге дейін 4,6 айдың медианасында ісік пайда болуын анықтай алады және AFP, AFP-L3 және PIVKA-II сарысу биомаркерлерімен салыстырғанда жоғары диагностикалық өнімділікті көрсетті.cDNA тестілеуінің диагностикалық мәні кескінді бағалау қол жетімді болмаған кезде көрсетілді, сондықтан cDNA тестілеу қауіпті топтардағы ерте HCC диагностикасында маңызды болып табылады.Жақында ғалымдар NGS технологиясын 3204 клиникалық үлгіде және cfDNA-да көп өзгермелі генетикалық вариация көрсеткіштерін (соның ішінде 5-гидроксиметилцитозин, 5′-мотив, фрагментация, нуклеосома ізі, HIFI) талдау үшін пайдаланды.Үш тәуелсіз пойыз, сынақ және сынақ жинақтары бар қайта тексерілген HIFI үлгілері HCC және HCC емес популяциялар арасында тиісінше 95,79% және 95,42% сезімталдықпен HCC-арнайы сынақтар мен сынақ жинақтарында тұрақты және сенімді кемсітушілікті көрсетті.Жыныстар сәйкесінше 95,00% және 97,83% құрады.HIFI әдісінің диагностикалық мәні HCC-ті цирроздан ажыратуда AFP-ге қарағанда жоғары.Сонымен қатар, ктДНҚ хирургиялық емдеуде де қолданылады.Атсуши және т.б.HCC бар науқастарда операция алдындағы ctDNA сарысу деңгейлерін анықтады және cDNA оң топтағы қайталану жылдамдығы мен бауырдан тыс метастаз жылдамдығы cDNA теріс тобына қарағанда айтарлықтай жоғары екенін және cDNA деңгейлері айтарлықтай корреляцияланғанын анықтады.ісіктің дамуымен.51 Жоғары сезімтал биомаркер бола отырып, ctDNA HCC тамырларды басып алу қабілетін болжай алады.Ван т.б.HCC бар 46 пациенттің толық геномдық секвенциясын жүргізді және көп нұсқалы талдау микротамырларға инвазия үшін кДНҚ нұсқасының аллель жиілігінің шекті мәні 0,83%, сезімталдық 89,7% және спецификалық 80,0% екенін көрсетті.резекцияланатын HCC микроваскулярлық инвазияның тәуелсіз қауіп факторы, бұл cDNA оңтайлы емдеуді басқаруға көмектесуі мүмкін.Қорытындылай келе, ctDNA HCC пайда болуына және дамуына толықтай қатысты және ерте скрининг, хирургиялық бағалау және ауруды бақылау үшін пайдаланылуы мүмкін.
КТК – қанға метастаз беретін бастапқы ісіктерден немесе метастаздардан алынған қатерлі жасушалар.Ісік жасушалары базальды мембрананы ыдырататын матрицалық металлопротеиназаларды (ММП) бөліп шығарады, бұл ісік жасушаларының қан мен лимфа тамырларына тікелей енуіне мүмкіндік береді.Дегенмен, CTC көпшілігі анокис, иммундық шабуыл немесе ығысу кернеуі арқылы тез жойылады.53 Эпителий-мезенхималық ауысу (EMT) КТК-ларды бастапқы ісік тінінен оңай бөліп алуға, капиллярларды басып алуға және өмір сүруді, метастазды, инвазивтілікті және дәріге төзімділікті айтарлықтай жақсартуға мүмкіндік береді.Зерттеулер бастапқы метастаздық ісіктердегі әртүрлі ісік жасушаларының арасында терең гетерогендік бар екенін көрсетті.Осылайша, CTC талдау ісік жасушаларының гетерогенділігін жан-жақты түсінуге әкелуі мүмкін.54
HCC-ассоциацияланған КТК үшін арнайы маркерлерге глипикан-3 (GPC3), азиалогликопротеиндік рецепторлар (ASGPR), эпителий жасушаларының адгезиясының молекуласы (EpCAM) және CD44, CD90, 55 және жасушааралық адгезия (molecula111) сияқты дің жасушаларымен байланысты маркерлер жатады.) .56 GPC3 маркері HCC патологиялық талдауы мен сипаттамасы үшін клиникалық түрде қолданылатын жасуша мембранасымен бекітілген ақуыз болып табылады.57 GPC3 экспрессиясы аралық және төмен дифференциациясы бар HCC ісік жасушаларында жиі кездеседі және бауырдан тыс миграцияға ықпал етеді;сонымен қатар, GPC3+ CTC бар болуы метастаздық HCC көрсетеді.58 ASGPR – гепатоциттердің бетінде ғана экспрессияланатын трансмембраналық ақуыз және жақсы дифференцирленген HCC-де жоғары дәрежеде экспрессияланады.EpCAM - CTC түсіру үшін ең жиі қолданылатын мембранамен байланысты ақуыздардың бірі.EpCAM Барселона ауруханасында (BCLC) қан тамырларының инвазиясы, бағаланған AFP деңгейлері және бауыр обырының озық сатысы сияқты HCC әртүрлі клиникопатологиялық ерекшеліктерімен сәйкес келетін дің жасушаларының сипаттамалары бар HCC жасушаларының беткі маркері ретінде анықталды59.60 CTC EMT фенотипі жоғары метастаздық.54 CTC-дегі EMT процестері HCC метастазына ықпал етеді.Виментин, бұралу, E-box цинк саусақпен байланыстыру (ZEB) 1, ZEB2, ұлулар, шлам және E-кадерин сияқты EMT маркерлерінің экспрессиясы HCC пациенттерінің бауырынан алынған КТК-да зерттелген.58 Ченг [61] әзірлеген CanPatrol™ жүйесі КТҚ-ны негізінен экспрессиялық маркерлерге негізделген үш фенотиптік ішкі топқа жіктеді: эпителий фенотипі (EpCAM, CK8/18/19), мезенхималық фенотип (виментин, ширатылған) және аралас фенотиптер.176 емделушіде жалпы КТК Бауырдың қатерсіз ауруынан HCC ажыратуда AFP-ден жоғары болды.Жалпы CTC, AFP және біріктірілген жалпы CTC және AFP үшін AUC мәндері 0,774 (95% CI, 0,704–0,834), 0,669 (95% CI, 0,587–0,750) және 0,821 (95% CI, 0,786) болды. ).), тиісінше.EMT негізіндегі CTC классификациясы HCC диагностикасын, ерте қайталануды, метастазды және жалпы уақыттың қысқаруын болжай алады.
Қазіргі уақытта ХҚКО анықтау әдістері физикалық әдістер мен биологиялық әдістерді қамтиды.Көбінесе биофизикалық қасиеттерге негізделген байыту деп аталатын физикалық әдістер негізінен ХҚКО-ның өлшемі, тығыздығы, заряды, қозғалғыштығы және деформациялануы сияқты физикалық қасиеттеріне байланысты.Физикалық қасиеттерге байланысты фильтрацияға негізделген жүйелер, диэлектрофорез және т.б. сияқты әртүрлі әдістер бар. Соңғысы, сондай-ақ иммуноффинділікке негізделген байыту деп аталады, негізінен антиген-антидене байланысына негізделген, өйткені әдіс ісікке тән биомаркерлерге қарсы антиденелерді пайдаланады. мысалы, EpCAM, ASGPR, адамның эпидермисінің өсу факторы 2 рецепторы (HER2), простата спецификалық антигені (PSA), адам панцитокератині (P-CK) және карбамоилфосфат синтаза 1 (CPS1).62 Байытусыз әдіс деп аталатын басқа түрі КТК-ларды лейкоциттерден жоғары ядро-цитоплазмалық қатынасы мен өлшеміне қарай саралау үшін ағындық цитометрияны пайдаланады.Қазіргі уақытта CTC анықтауға арналған FDA мақұлдаған жалғыз сынақ - EpCAM жасуша бетінің маркерін пайдаланатын Cell-Search™ жүйесі. Дегенмен, біріктірілген маркерлерге негізделген CTC анықтау позитивтілік жылдамдығын арттыруы мүмкін.54 ASGPR және CPS1-ге қарсы антиденелердің қоспасы HCC пациенттерінде 91% CTC анықтау жылдамдығына қол жеткізді.63 Чжан және басқалар ASGPR-ға қарсы антиденелер бар CTC-чипті пайдаланды, P. -CK және CPS1 және HCC пациенттерін бауырдың қатерсіз ауруы немесе HCC емес обыры бар науқастардан 100% жылдамдықпен саралады.64 Ванг жүргізген зерттеу HCC 42 пациенттің 60% -ында EpCAM+ CTC анықтады және екі позитивтілік арасында маңызды корреляцияны тапты. жылдамдығы мен TNM сатысы бар КТК саны.65 Гуо және басқалар AFP деңгейі <20 нг/мл, сезімталдығы 72,5% және спецификалық 95,0%, 57,0% және 90,0% AFP үшін 20 нг/мл үзіліспен салыстырғанда.66 AFP және CTC комбинациясы HCC анықтауды жақсартуы мүмкін.45 Топтарды ерте скринингте КТК AFP-тен артықшылығы бар деп есептеледі. HCC қаупі жоғары. Дегенмен, біріктірілген маркерлерге негізделген CTC анықтау позитивтілік жылдамдығын арттыруы мүмкін.54 ASGPR және CPS1-ге қарсы антиденелердің қоспасы HCC пациенттерінде 91% CTC анықтау жылдамдығына қол жеткізді.63 Чжан және басқалар ASGPR-ға қарсы антиденелер бар CTC-чипті пайдаланды, P. -CK және CPS1 және HCC пациенттерін бауырдың қатерсіз ауруы немесе HCC емес обыры бар науқастардан 100% жылдамдықпен саралады.64 Ванг жүргізген зерттеу HCC 42 пациенттің 60% -ында EpCAM+ CTC анықтады және екі позитивтілік арасында маңызды корреляцияны тапты. жылдамдығы мен TNM сатысы бар КТК саны.65 Гуо және басқалар AFP деңгейі <20 нг/мл, сезімталдығы 72,5% және спецификалық 95,0%, 57,0% және 90,0% AFP үшін 20 нг/мл үзіліспен салыстырғанда.66 AFP және CTC комбинациясы HCC анықтауды жақсартуы мүмкін.45 Топтарды ерте скринингте КТК AFP-тен артықшылығы бар деп есептеледі. HCC қаупі жоғары.Дегенмен, маркер негізіндегі КТК біріктірілген анықтау оң нәтижелердің пайызын арттыруы мүмкін.54 Анти-ASGPR және CPS1 антиденелерінің қоспасы HCC бар науқастарда 91% CTC анықтау жылдамдығына қол жеткізді.63 Чжан және т.б.ASGPR, P-CK және CPS1 қарсы антиденелері бар CTC-чипті қолданды, сондай-ақ HCC бар науқастарды бауырдың қатерсіз ауруы бар немесе HCC емес пациенттерден 100% жылдамдықпен ажыратты.частота и количество ЦОК со стадией TNM.65 Guo и соавторы обнаружили, он показатель ПЦР, полученный из ЦОК, ол повышен у 125/171 (73%) пациентов, у которых уровень АФП болды <20 нг/мл 5%, и специфичность 95,0% по сравнению с 57,0% және 90,0% үшін АФП при поровом уровне 20 нг/мл.66 Комбинация АФП және ЦОК мүмкін улучшить обнаружение ГЦК.45 Считается, что ЦК.45 Считается, что ЦК.45 Считается, что ЦПК. групп. TNM сатысы бар КТК жиілігі мен саны.65 Гуо және басқалар AFP деңгейі <20 нг/мл болатын 125/171 (73%) пациентте КТК-дан алынған ПТР жоғарылағанын, сезімталдығы 72,5% және ерекшелігі 20 нг/мл шекті деңгейде AFP үшін 57,0% және 90,0% салыстырғанда 95,0%.66 AFP және CTC комбинациясы HCC анықтауды жақсартуы мүмкін.45 КТК ерте скринингте AFP артықшылығы бар деп саналады. топтар.HCC қаупі жоғары.Дегенмен, маркер негізіндегі КТК біріктірілген анықтау оң нәтижелердің пайызын арттыруы мүмкін.54 Анти-ASGPR және CPS1 антиденелерінің қоспасы HCC бар емделушілерде 91% CTC анықтау жылдамдығына қол жеткізді.63 Чжан және т.б.ASGPR, P-CK және CPS1 қарсы антиденелері бар CTC чиптерін қолданды және HCC бар науқастарды 100% бауырдың қатерсіз және HCC емес ауруларынан ажыратты.64 Вангтың зерттеуі 42 HCC пациентінде EpCAM+ КТК-ның 60%-ын анықтады және TNM сатысындағы КТК жиілігі мен саны арасында маңызды корреляцияны анықтады. 65 гуо 等 人 人, 在 AFP 水平 <20 NG / ML 的 125/171 (73%) (73%) 名名患者, CTC 的衍生衍生, 的衍生衍生评分, 的衍生衍生评分评分, 敏感性敏感性 72,5%, 特异性 为 72,5%, 特异性 为 95.0%, 而 为 95.0%, 而 AFP 95.0%, 而 afp 在 截止 截止 截止值为20 нг/мл 时的特异性为57,0% 和90,0%。 65 GUO 等 等 等 等 等 等 发现 人 在 在 在 在 在 在 在 在 在 在 在 在 在 在 在 在 在 在 在 在 在 在 在 在 在 在 在 在 在 在 在 在 125/171 (73%) 名 ,,,,, CTC 衍生, 敏感性 为 为 72,5%, 为 95,0%, AFP, AFP 在 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止值 截止值 截止值 截止 截止值 截止值 截止值 截止值 截止值 时 时 时 特异性 为 为 57,0% 和 80,0%.65 Guo et al.обнаружили, что у 125/171 (73%) пациентов с уровнем АФП <20 нг/мл показатели ПЦР, полученные с помощью ЦОК, 72,5% және специфичность в специфичность 95,0% отсечки Специфичность составляла 20 нг/мл. AFP деңгейі <20 нг/мл болатын 125/171 (73%) емделушіде CTC алынған ПТР мәндері 72,5% сезімталдықпен және 95,0% спецификамен жоғарылағанын анықтады, ал AFP шектік спецификатта болды. 20 нг/мл болды.мл 57,0% және 90,0% құрады.66 ORP және CTC комбинациясы HCC анықтауды жақсартады.45 CTC жоғары қауіпті HCC популяцияларын ерте скринингте AFP-ден жоғары деп саналады.Осылайша, CTC-оң және жоғары қауіпті HCC топтары үшін CTC сынағы ультрадыбыстық және AFP анықтаумен жүйелі түрде біріктірілуі керек.Дегенмен, КТК ісік метастазының және қайталануының маңызды болжаушылары болып саналады, ал КТК анықтау диагностикалық құрал ретінде тәуелсіз ұсынылмайды.62 Сондықтан CTC қазіргі уақытта қолданылатын басқа маркерлерге қарағанда жақсы болжамдық биомаркер ретінде қызмет етуі мүмкін. Чжоу және басқалар EpCAM+ CTC және реттеуші Т жасушаларының жоғары саны бар емделушілерде КТК саны аз адамдарға қарағанда HCC қайталануының жоғары қаупін көрсетті, қайталану коэффициенті 66,7% және 10,3% (P <0,001).67 Ұқсас зерттеу туралы Zhong және басқалар хабарлаған.68 Сонымен қатар, Ци 112 пациенттің 101-інде (90,81%) HCC бар, соның ішінде ерте сатыдағы аурумен ауыратын науқастарда КТК оң болғанын және өте кішкентай HCC түйіндері 3-тен кейін анықталғанын анықтады. 5 айға дейін бақылау. Чжоу және басқалар EpCAM+ CTC және реттеуші Т жасушаларының жоғары саны бар емделушілерде КТК саны аз науқастарға қарағанда HCC қайталануының жоғары қаупін көрсетті, қайталану коэффициенті 66,7% және 10,3% (P <0,001).67 A. ұқсас зерттеуді Zhong және басқалары хабарлады.68 Сонымен қатар, Ци СГК бар 112 пациенттің 101-інде (90,81%), соның ішінде ауруының ерте сатысында, КТК оң нәтиже бергенін және өте кішкентай HCC түйіндері 3-тен кейін анықталғанын анықтады. 5 айлық бақылау. Чжоу және т.б.обнаружили, что у пациентов с повышенным количеством ЦОК EpCAM+ және регуляторных Т-клеток тәуекелді жоғарылату рецидиві ГЦК болды жоғары, чем у пациентов с азким количеством ЦОК, коэффициенттердің рецидиві 66,7% қарсы 10,03% (10,03%). Чжоу және басқалар EpCAM+ КТК жоғары және реттеуші Т жасушалары бар емделушілерде КТК төмен пациенттерге қарағанда HCC қайталану қаупі жоғары екенін анықтады, қайталану жиілігі 66,7% және 10,3% (P<0,001 )67.Осыған ұқсас зерттеуді Чжун және т.б.68. Сонымен қатар, Ци 112 науқастың 101-інде (90,81%) HCC бар, оның ішінде ерте аурумен ауыратындар, КТК бар екенін және 3-5 айлық бақылаудан кейін өте кішкентай HCC түйіндері анықталғанын анықтады. Zhou 等 人 发现, 与, 与 CTC 数量 较 少 少 的 的 的 的 患者 患者 患者 患者, EPCAM + CTC 和和 调节性和和和 调节性和 调节性和 调节性和 数量调节性 调节性 调节性调节性 升高细胞升高高高高高, 发生 发生发生高, 发生 发生高高, 发生患者高 66,7% 和 10,3% 和 10,3% (p <0.001). Zhou 等 人 人 人 发现 与 与 与 与, EPCAM + CTC 数量 患者, EPCAM + CTC 数量 数量患者患者患者, p <0,001) 。………………………………………………………………………………………………………………………… Чжоу және т.б.обнаружили, бұл пациенттер С повышенным количеством ЦОК EpCAM+ және регуляторных Т-клеток имели более жоғары тәуекел рецидива ГЦК по сравнению с пациентами с меньшим количеством ЦОК, с частотой рецидивов 66,7% и <%301 (совет %301). Чжоу және т.б.EpCAM+ КТК жоғары және реттеуші Т жасушалары бар емделушілерде КТК аз емделушілермен салыстырғанда HCC қайталану қаупі жоғары екенін анықтады, қайталану жиілігі сәйкесінше 66,7% және 10,3% (P <0,001).Осыған ұқсас зерттеуді Чжун және т.б.68 Сонымен қатар, Qi 112 HCC пациенттерінің 101-і (90,81%), соның ішінде ерте ауруы бар науқастар, оң CTC нәтижелерін анықтады және 3 рет барғаннан кейін өте кішкентай HCC түйіндерін тапты.Бақылау 5 айға дейін.Олар сондай-ақ созылмалы HBV инфекциясы бар 12 пациентте КТК тапты және CTC-оң 2 пациентте 5 ай ішінде шағын HCC ісіктерін тапты.69 Осылайша, CTCs HCC болжау үшін пайдаланылуы мүмкін, 70, бірақ оларды болжамдық биомаркерлер ретінде әдеттегідей пайдалануға болады.
cfDNA сияқты, cfRNA әртүрлі жүйелер арқылы қанға жіберіледі.Перифериялық қандағы бұл молекулалар қатерлі ісік тінін білдіреді.Инвазивті емес әдістермен анықталған маркерлермен салыстырғанда, cfRNAs динамикалық реттелетін, тіндерге тән және жасушадан тыс ортада көп.HCC-дегі 71 miRNAs (miRNAs) маңыздылығы мен диагностикалық мәні көптеген зерттеулерде хабарланған.miRNAs - мақсатты хабаршы РНҚ (мРНҚ) трансляциясын тежеу ​​арқылы әртүрлі молекулалық биологиялық белсенділіктерді реттейтін эндогендік кодталмаған РНҚ (ncRNA).miRNAs экзосомалармен қапталған апоптотикалық денелерде орналасқан, бірақ олар сонымен қатар перифериялық қандағы сарысу ақуыздарымен және липидтермен тұрақты байланыса алады және HCC бағалау үшін пайдаланылуы мүмкін.микроРНҚ бауыр регенерациясына, липидтер алмасуына, апоптозға, қабынуға және HCC дамуына қатысады.HCC-де miR-21, miR-155 және miR-221 сияқты 72 онкогенді миРНҚ жақсы белгілі.Атап айтқанда, miR-21 жасушадан тыс матрицада және фиброзда коллаген синтезінде маңызды рөл атқарады және гемопоэтикалық дің жасушаларын белсендіру арқылы гепатокарциногенезге ықпал етеді.72,73 HCC ішіндегі ісіктерді басатын миРНҚ-ларға miRNA-122, miRNA-29, Let-7 отбасы және miRNA-15 отбасы жатады.Let-7 отбасы RAS тобына бағытталған көптеген ісіктерді басатын миРНҚ-дан тұрады.miR-15 отбасына миР-15a, miR-15b, miR-16, miR-195 және miR-497 кіреді, олардың белгілі бір мРНҚ үшін қосымша реттілігі бар.Сонымен қатар, ұзақ кодталмаған РНҚ (lncRNAs) және айналмалы РНҚ (цирРНҚ) да HCC ерте скринингі үшін маңызды.lncRNAs ncRNA-ның ең кең класын білдіреді, соның ішінде мРНҚ тәрізді ncRNA-лар және адамның көптеген ауруларының патогенезіне қатысады.LncRNAs бауыр микроортасында және созылмалы бауыр ауруында реттеуші рөл атқарады.74 CircRNA-лар сонымен қатар ген экспрессиясын реттеуде көптеген қызметтері бар ncRNAs класы болып табылады.Жақында circRNAs HCC диагностикалық құралы ретінде қарастырылды.
Айналымдағы бос РНҚ тамаша тұрақтылыққа ие, оның ішінде температураға, рН және RNase әсеріне төзімділік бар, бұл стандартты РНҚ тазарту әдістерін қолдана отырып, шеткергі қаннан fnRNA оқшаулауын аз жалықтырады.Ең жиі қолданылатын әдістерге NGS, microarray және RT-qPCR жатады.NGS микроРНҚ-ларды геном бойынша өлшеуге мүмкіндік береді.Бірақ бұл әдіс қымбат және талдау стандартталмаған.Керісінше, RT-qPCR қымбат емес, нуклеин қышқылдарын тез күшейтеді және жоғары сезімталдық, жоғары дәлдік, кең динамикалық диапазон және аз үлгілерді қажет ету сияқты көптеген артықшылықтарды ұсынады.Микромассивтер - қосымша ДНҚ зондтары бар мақсатты миРНҚ-ларды сезімтал және арнайы будандастыруға негізделген миРНҚ анықтау үшін қолданылатын басқа әдіс, 75, бірақ микромәліметтер талдауы көп уақытты қажет етеді.
Айналымдағы miR-122 және Let-7 жоғары тәуекел топтарында ерте сатыдағы HCC диагностикасында, HBV-мен байланысты қатерлі ісік алды түйіндері бар пациенттердегі маркерлерде және ерте сатыдағы HCC диагностикасында әлеуетті пайдалы екені хабарланды.76 Cai және т.б.Let-7 отбасы мүшелерінің (miR-92, miR-122, miR-125b, miR-143, miR-192, miR-16, miR-126 және miR-199a/b) созылмалы ауру қаупі бар екенін анықтады. Гепатитпен ауыратын науқастардағы HCC.Let-7 отбасы созылмалы С гепатитімен байланысты жоғары тәуекел топтарында HCC дамуын болжау үшін тиімді суррогат биомаркер ретінде қызмет ете алады. 77 miR-122 бауыр циррозы бар науқастарда ерте HCC анықтауда жоғары диагностикалық дәлдікке ие.78 Айналымдағы MiR-107 қан сарысуы да HCC ерте кезеңдерінде бағаланды, 79 және жоғары тәуекелді популяцияларда жақсы әлеуетті көрсетті.Чжоу және басқалар miRNAs (miR-122, miR-192, miR-21, miR-223, miR-26a, miR-27a және miR-801) панелі HCC созылмалы В гепатитінен (CHB) және цирроздан ажырата алатынын хабарлады. сезімталдық тиісінше 79,1% және 75%, ал ерекшелік 76,4% және 91,1% болды.80 ВГВ-мен байланысты HCC-де біз HCC жоқ созылмалы HBV пациенттерімен салыстырғанда miR150 деңгейінің айтарлықтай төмендегенін анықтадық (сезімталдық 79,1%, ерекшелік 76,5%).Дені сау бақылаулармен салыстырғанда HCC-де -224 жоғары болды, ал кіші топтық талдаулар HBV-мен байланысты HCC бар емделушілерде жоғары деңгейлерді көрсетті.В гепатиті циррозы және HCC пациенттері әртүрлі бақылауларда HCC анықтай алатын жеті дифференциалды экспрессияланған siRNA бар siRNA жіктеуішін анықтады;Ерте скрининг кезінде AUC диапазоны AFP еріктілеріне қарағанда жақсы.Олар төрт miRNA (miR-1972, miR-193a-5p, miR-214-3p және miR-365a-3p) HCC бар науқастарды HCC жоқ пациенттерден ажырата алатынын анықтады.Бес шамадан тыс миРНҚ (miR-122-5p, miR-125b-5p, miR-885-5p, miR-100-5p және miR-148a-3p) HCC, цирроз және CHB биомаркерлерінде ықтимал HBV инфекциялары болып саналады, әсіресе miR-34a-5p бауыр циррозының биомаркерлері болуы мүмкін85 және қауіптілігі жоғары популяцияларда HCC ерте скринингі үшін әлеуетті биомаркерлер болуы мүмкін.HCC ішіндегі ең көп зерттелген lncRNA бауыр ісігінде (HULC) жоғары белсендірілген.Басқа зерттеулер HCC пациенттерінде айналымда болатын HULC диагностикалық маркер ретінде пайдаланылуы мүмкін екенін көрсетті, себебі бұл lncRNA сау адамдармен салыстырғанда HCC пациенттерінде жоғары реттеледі.71,86 Басқа lnRNA-лардың арасында LINC00152 жоғары AUC, сезімталдығы мен ерекшелігіне байланысты ең жақсы диагностикалық lncRNA болып саналады.86 Бір зерттеуде LINC00152 перифериялық қан экспрессиясы қалыпты дені сау адамдардан CHB және циррозы бар емделушілерге дейін біртіндеп өсті және ақырында HCC-де ең жоғары болды.HCC бар пациенттердің плазмасындағы circSMARCA5 экспрессиясын зерттеу гепатиттен циррозға және ісік алды зақымдануға дейінгі HCC экспрессиясының үдемелі төмендеуін көрсетті.87 ROC қисықтарының талдауы гепатиті немесе бауыр циррозы бар емделушілерді, әсіресе AFP деңгейі 200 нг/мл-ден төмен науқастарды айыру үшін осы циркРНҚ әлеуетін растады.Сонымен қатар, Чжу HBV-ассоциацияланған HCC пациенттерінің плазма үлгілеріндегі 13 617 циклдік РНҚ-ға талдау жасады және 6 циклдік РНҚ HCC және HBV-мен байланысты циррозда әртүрлі экспрессияланғанын растады, бұл cRNA-ның пайдалы болуы мүмкін екенін көрсетті.бауыр ауруларымен, склерозбен ауыратындар сияқты жоғары тәуекел топтарын ерте скринингке арналған маркерлер.88
Экзосомалар диаметрі 40–160 нм мембраналық көпіршіктер;көптеген жасушаішілік көпіршіктер жасуша жарғақшасымен біріктіріліп, жасушадан тыс матрицаға шығарылады.Олардың құрамында көптеген белсенді компоненттер, соның ішінде липидтер, ақуыздар, РНҚ және ДНҚ бар және HCC және HCC емес жасушалар арасындағы байланыста маңызды рөл атқарады.89,90 Экзосомалар гепатоциттердің фибробласттары мен жұлдызша жасушаларын, иммундық жасушаларды, қалыпты гепатоциттерді және HCC жасушаларын белсендіру арқылы HCC прогрессиясын реттейді.91 Ісік микроортасында ісік жасушалары рак клеткаларынан жетілмеген жасушаларға тасымалданатын көптеген экзосомалар шығарады, олар өз кезегінде онкогенезге, деградацияға және жасушалық сигнал беруге қатысады.92 Зерттеулер көрсеткендей, экзосомалар онкогендерді қалыпты жасушаларға патологиялық процестер кезінде тасымалдай алады, бұл ісіктердің инвазиясы мен метастазының механизмдерінің бірі болуы мүмкін.93 Қатерлі ісік прогрессіндегі экзосомалардың рөлі динамикалық және қатерлі ісік түріне тән болуы мүмкін, 89 Экзосомалар жасушааралық байланыс иондары мен жасушалық микроортаның өзара әрекеттесуіне қатысуы мүмкін реципиент жасушалардағы бірнеше мақсатты гендерді реттеу үшін көрші немесе алыс жасушалармен ішкі болуы мүмкін. жасушалық сигнал беру мен метаболизмге делдалдық етеді.94 Экзосома жүк молекулаларының сипаттамалары мен динамикалық өзгерістері ата-аналық ісік жасушаларының сипаттамалары мен динамикалық өзгерістерін тікелей көрсетеді,95 бұл сонымен қатар қатерлі ісік диагностикасы мен болжамында экзосомаларды қолданудың негізі болып табылады, сонымен қатар ісікке қарсы терапияға жеке реакцияны болжау үшін негіз болып табылады. ..96
Экзосомаларды оқшаулау мен талдаудың дәстүрлі зертханалық әдістері күрделі, көп сатылы және көп уақытты қажет етеді, оның ішінде ультрацентрифугалау, сүзу, өлшемді алып тастау хроматографиясы, иммуноаффинді тазарту, вестерн блотинг, ферментпен байланысты иммуносорбентті талдау (ELISA), ПТР және ағынды талдау.Экзосомаларды жылдам, ыңғайлы in situ оқшаулау үшін микро/нанотехнологияларды қолданатын миниатюрленген жүйелер мен зертханалық платформалар кеңінен әзірленуде.Нанобөлшектерді бақылау талдауы (NTA) - магниттік нанобөлшектерді және полигидроксиалканаттар сияқты әдістерді қоса алғанда, экзосомалардың мөлшері мен концентрациясын сипаттаудың кеңінен қолданылатын әдісі.Микрофлюидтік және электрохимиялық әдістер де жоғары өнімділікте экзосомаларды жылдам анықтай алады.
Экзосомалық ақуыздар HCC диагностикасы үшін маңызды маркерлер болып табылады.Arbelaiz зерттеуінде 98 RasGAP SH3 байланыстыратын ақуыздың (G3BP) және полимерлі иммуноглобулиндік рецепторлардың (PIGR) деңгейі HCC туынды экзосомаларда айтарлықтай жоғарылады және екі ақуыздың болжамды біріктірілген тиімділігі AFP-тен жоғары болды.Темірдің шамадан тыс жүктелуі HCC дамуына ықпал ететін маңызды фактор болып табылады.Ценг гепцидиннің HCC қарсылығында шешуші рөл атқаруы мүмкін екенін хабарлады.99 HCC пациенттерінің сарысуларынан алынған экзосомаларда олардың сау аналогтарына қарағанда гепцидин мРНҚ нұсқаларының көшірме саны айтарлықтай жоғары болды, бұл гепцидиннің HCC үшін жаңа диагностикалық биомаркер болуы мүмкін екенін көрсетеді.100 HCC өндіретін экзосомалардағы 14-3-3ζ протеині Т-жасушаларының белсендірілуін, пролиферациясын және дифференциациясын азайтады және Т-жасушаның реттеуші Т-жасушаларына айналуын тудыруы мүмкін, нәтижесінде Т-жасушалары сарқылады.101 Бұл иммундық бақылаудан ісіктерді болдырмауды зерттейтін бірнеше зерттеулермен расталады, 102 бұл HCC ісіктерінің пайда болуына ықпал етуі мүмкін.
Плазмада немесе сарысуда экРНҚ болуымен қатар, РНҚ-мен байытылған экзосомалар ісіктерді ерте скринингте инвазивті емес нақты уақыт режимінде анықтау және ісік эволюциясы мен терапияға жауапты анықтау үшін пайдаланылуы мүмкін.ГСС тобындағы қан сарысуындағы экзосомалық miRNA-21 деңгейі CHB тобына қарағанда 2,21 есе, ал HCC тобында сау популяцияға қарағанда 5,57 есе жоғары болды.Ванг зерттеуінде экзосомалар AUC мәндері 0,83 (95% CI 0,74–0,93) және 0,94 (95% CI 0,88–1,00) мәндері бар циррозбен ауыратын науқастармен салыстырғанда HCC-ны айтарлықтай арттырды.104 Алынған деректер онкогенезді және HCC прогрессиясын реттеуге арнайы экзосомалық жүк молекулаларының қатысуын анықтады.105 Сарысудағы miR-221, miR-103, miR-181c, miR-181a, miR-93 және miR-26a экспрессиясы сәйкес келеді.және метастаз және miR21 деңгейлері дені сау бақылаулардағы, сондай-ақ CHB пациенттеріне қарағанда HCC пациенттерінде әлдеқайда жоғары болды.102 LncRNA HCC-де ықтимал диагностикалық мәнге ие болды.Зерттеулер HCC пациенттерінің сарысуларынан алынған экзосомалар HCC жоқ емделушілерге қарағанда LINC00161, LINC000635 және lncRNA трансформациясы арқылы белсендірілген lncRNA деңгейлерінің айтарлықтай жоғары екенін көрсетті және бұл lncRNAs TNM сатысы мен ісік көлемімен тығыз байланысты.110 Conigliaro және т.б.CD90+ экзосомаларының lncRNAH19 жоғары деңгейлерін білдіретіні анықталды, бұл тамырлық эндотелий өсу факторының (VEGF) шығарылуын және VEGF-R1 рецепторларының өндірісін айтарлықтай арттырды, осылайша ангиогенезді ынталандырады.93 ЦиркРНҚ-лар экзосомалық ncRNA-лардың басқа түрі болып табылады – түрлер бойынша төменгі, бірақ тұрақты деңгейлерде көрсетілген, циркРНҚ-лар сонымен қатар жасуша түріне, ұлпа түріне, даму кезеңіне және реттеуші белсенділікке тән ерекшелік көрсетеді.111 circRNA ерте және аз инвазивті қатерлі ісік үшін диагностикалық биомаркерлер болып табылады.112 Жақында жүргізілген клиникалық зерттеулер HCC болжаудағы жеке миРНҚ-ның ерекшелігі идеалды емес екенін көрсетті.Сондықтан бірнеше талдауларды (мысалы, miR-122 және miR-48a AFP-мен біріктірілген) пайдалана отырып, кешенді анықтау ерте HCC идентификациясын және цирроздан HCC дифференциациясын жақсартуы мүмкін.100
CHB және бауыр циррозы бар науқастар HCC дамуының ең көп таралған жоғары тәуекел тобы болып табылады.Тәуекел деңгейі жоғары топтар үшін тұрақты вирусологиялық жауапқа қол жеткізгеннен кейін, HCC тәуекеліне негізделген үнемді қадағалау стратегиясын әзірлеу керек, ал ерте скрининг – жоғары экономикалық тиімділік коэффициенті бар HCC диагностикасы мен емдеуін жақсартудың кілті2 ..Қатерлі ісік ауруының ерте скринингтік әдістерінің көптеген шектеулері бар: қатерлі ісіктің көптеген түрлері үшін ерте скринингтің тиімді әдістері әзірленбеген және ұстану әдетте төмен.Дәстүрлі ерте скрининг әдістерімен салыстырғанда, сұйық биопсияның технологиясы айқын артықшылықтарға ие: сынама алудың қарапайымдылығы, панракты анықтау, үлгінің жақсы қайталануы және ісіктердің гетерогенділігіне тиімді жауап.Сұйық биопсиямен байланысты әдістердің үнемділігін ескере отырып, оларды HCC скринингінде пайдалану жүйелі түрде тексерілмеген.Молекулярлық деңгейде дәл анықтаудағы жетістіктерге қарамастан, сұйықтық биопсиясы мақсатты пациенттерде HCC анықтау үшін қымбатқа түседі, бұл ультрадыбыстық және магнитті-резонансты бейнелеу сияқты арнайы бейнелеу процедураларымен салыстырғанда оның кеңінен қолданылуын шектейді.113,114 Дегенмен, алдыңғы зерттеу сұйық биопсияның сапасы түзетілген өмір сүру жылдарында (QALY) айтарлықтай пайда көрсеткенін көрсетті.115 Асқазан мен мұрын-жұтқыншақтың ерте карциномасында сұйық биопсияның пайдасы да көрсетілген.116,117 Қазіргі көзқарас сұйық биопсия ісіктерді анықтау және диагностикалауда сарысу биомаркерлері мен радиологиялық скринингті толықтыра алады.117 118
Ағымдағы әдебиеттерге сәйкес, сұйықтық биопсиясы технологиясы бауыр қатерлі ісігінің жоғары тәуекел топтарын ерте скринингте айтарлықтай жоғары сезімталдық пен ерекшелікті көрсетті.Сұйықтық биопсиясының түріне қарамастан, ол СГК жоқ жоғары қауіпті адамдардан HCC ажырата алады, бұл ерте скринингтің маңыздылығын көрсетеді, өйткені жоғары қауіпті және сау адамдар арасындағы айырмашылықтар айқын.ctDNA қысқа жартылай ыдырау кезеңіне ие және HCC анықтау үшін пайдаланылуы мүмкін, сондықтан ісіктен алынған cDNA-дағы кез келген өзгерістер нақты уақытта ісік прогрессиясының нақты дәлелдерін қамтамасыз ете алады, әсіресе кішкентай ісіктер үшін.ctDNA жоғары деңгейі қатерлі ісіктің дамуы мен таралуын көрсетеді және прогресс пен қайталанудың ерте көрсеткіші болып табылады.Сонымен қатар, ctDNA нәтижелеріне сүйене отырып, науқастар жеке емдеу және бақылауды ала алады.119 Арнайы метилдену орындары HCC және цирротикалық түйіндерді ерте анықтау үшін AFP-ге қарағанда жақсы маркер болуы мүмкін.HCC резекциялық жағдайларда cDNA-ның жоғары деңгейі микроваскулярлық инвазияны және операциядан кейінгі қайталану мен метастазды көрсетеді.Көшірме санының өзгеруі HCC бар науқастардың өмір сүруімен байланысты.cDNA бағалауы HCC жалпы емдеуге қатысуы мүмкін деп болжауға болады, және cDNA терапевтік модуляцияның тиімді көрсеткіші ретінде қызмет ете алады.Тиімділікті болжау және дәріге төзімділікті бақылау үшін ctDNA-дағы ерекше генетикалық мутацияларға негізделген маркерлер клиникалық нұсқаулармен қабылданған.ctDNA тестілеу ерте скрининг үшін ең пайдалы сұйық биопсия құралы болуы мүмкін.КТК жоғары қауіпті HCC топтарын ерте скринингте шешуші рөл атқарады.HCC-ассоциацияланған КТК-ның әртүрлі маркерлері HCC пайда болуы, дамуы және қайталануында ерекше маңызды болып табылады.Мембраналық көпіршіктер ретінде экзосомалар жасушааралық байланыстарға, әсіресе HCC жасушаларында қатысады.Айналымдағы микроРНҚ қанда тұрақты, сондықтан HCC ерте скринингі үшін пайдалырақ болуы мүмкін.Бірте-бірте экзосомалық ақуыздар мен РНҚ-ға бай экзосомалар ашылды және олардың HCC үшін болжамды тиімділігі расталды.Бір қызығы, HCC әртүрлі этиологиялары әртүрлі мутациялармен байланысты болуы мүмкін, сондықтан біз HCC әртүрлі этиологияларына негізделген ерте скрининг үшін әртүрлі биомаркерлерді таңдай аламыз.120
Дегенмен, қазіргі сұйықтық биопсиясы әдістері тұрақтылық тұрғысынан күмәнді және HCC ерте скринингін немесе мониторингін дербес жүргізе алмайды, бірақ әлі де жеке скрининг пен диагностиканы толықтыра алады.121 Сұйық биопсияның бір түрі ретінде ctDNA, CTC, cfRNA және экзосомамен байланысты AFP немесе PIVKA-II анықтау және бейнелеу HCC ерте диагностикасы мен болжамында перспективалы қолданбаларға ие.Дегенмен, ктДНҚ-ның қанға бөлінуінің нақты механизмі әлі де анықталуы керек.КтДНҚ-ның негізгі биологиялық қасиеттерін ашу оны маркер ретінде пайдалануды жеңілдетуі мүмкін.Айналымдағы ктДНҚ-ның аз мөлшері және үлгіні өңдеуге қойылатын қатаң талаптар HCC-де кДНҚ анықтауды клиникалық жүзеге асыру үшін қиындықтар болып табылады.Сонымен қатар, генетикалық мутацияларда канцерогендерді дәл анықтауға мүмкіндік беретін ерекше белгілер жоқ.Көптеген генетикалық және соматикалық нұсқалар қалыпты тіндерде де болатындықтан, сұйықтық биопсиясы арқылы анықталған генетикалық мутациялар HCC ерте скринингінде шектеулі пайдалы болуы мүмкін.122 КДНҚ-ны ісік емес ДНҚ-дан ажыратуға көмектесетін нақты анықталған пайдалы ген нысандары мен биомаркерлердің шектеулері кДНҚ пайдаланудағы ең маңызды мәселелер болып табылады.КТК анықтау үшін сезімтал және арнайы маркерлердің пайдалылығының болмауы.Тек метастатикалық потенциалы бар өміршең жасушалар табылды, ал CSC байытылған маркерлердің оңтайлы комбинациясы түсініксіз болды.Мәдениет үшін КТК оқшаулау және олардың мутациялық профильдерін бағалау да күрделі міндет болып табылады.Экзосомаларды идентификациялау, оқшаулау және тазарту проблемаларына байланысты нақты молекулалық механизм әлі күнге дейін түсініксіз, ал экзосомалар мен HCC механизмі туралы алдыңғы зерттеулер тереңдетілген жоқ және миРНҚ, lncRNA және ақуыздардың экзосомаларға сұрыпталуы , және экзосоманы қабылдаудың белгілі бір типті процесс екендігі анық емес.HCC диагностикасы мен емдеу үшін экзосомаларды қолдану әлі де клиникаға дейінгі кезеңде.Қан жинау үшін қолданылатын түтіктердің түрі, қан көлемі, үлгіні сақтау және анықтау, оқшаулау және байыту сияқты сұйық биопсия процедураларының стандартталмағандығы медициналық орталықтардағы тәжірибелердегі айырмашылықтарға байланысты оларды әдеттегі клиникалық тәжірибеде қолдануға кедергі келтіруі мүмкін.Сұйық биопсияның ерте скринингте, диагностикада, тиімділікті бағалауда және HCC болжауда тиімділігі, әсіресе жоғары тәуекел топтары үшін әлі де зерттелуі керек.Сұйық биопсияның технологиясы үлкен әлеуетке ие және жақын арада бауыр обырының клиникалық тәжірибесінде кеңінен қолданылады деп күтілуде.
1. Sung H., Furley J., Siegel RL және т.б.Жаһандық қатерлі ісік статистикасы 2020: GLOBOCAN 185 елде қатерлі ісіктің 36 түрінен болатын ауру мен өлімді бағалайды.CA Cancer J Clin.2021;71(3):209-249.doi: 10.3322/caac.21660
2. Денсаулық сақтау жөніндегі ұлттық комиссияның штаб-пәтері.Бауырдың біріншілік обырын диагностикалау және емдеу критерийлері (2022 жылғы басылым) [J].Бауырдың клиникалық аурулары журналы, 2022, 38(2): 288-303.doi: 10.3969/j.issn.1001-5256.2022.02.009
3. Чжоу Дж, Сун Н, Ван З, т.б.Гепатоцеллюлярлық карциноманы диагностикалау және емдеу бойынша нұсқаулық (2019 жылғы басылым).Бауыр ісігі.2020;9(6):682-720.doi: 10.1159/000509424
4. Кокудо Н, Такемура Н, Хасегава К, т.б.Гепатоцеллюлярлық карциномаға арналған клиникалық тәжірибе нұсқаулары: Жапон бауыр аурулары қоғамы, 2017 (JSH-HCC 4-ші нұсқаулар), 2019 жаңарту.Бауыр ауруларының резервуары.2019;49(10):1109–1113.doi: 10.1111/hepr.13411
5. Баррера-Салдана ХА, Фернандес-Гарза Л.Е., Баррера-Баррера SA Созылмалы бауыр ауруындағы сұйық биопсиясы.Энн Гепато.2021;20:100197.doi:10.1016/j.aohep.2020.03.008
6. Тай Т.Қ.Ю., Таң П.Х.Сүт безі қатерлі ісігінің сұйық биопсиясы: бағытталған шолу.Arch Pathol Lab Med.2021;145(6):678–686.doi: 10.5858/arpa.2019-0559-RA
7. Канвал Ф., Сингал AG Гепатоцеллюлярлық карциноманы қадағалау: ағымдағы үздік тәжірибелер және болашақ бағыттар.Гастроэнтерология.2019;157(1):54-64.doi:10.1053/j.gastro.2019.02.049
8. Еуропалық зерттеу қауымдастығы L, Еуропалық ұйым R, C Therapeutics.EASL-EORTC клиникалық нұсқаулары: гепатоцеллюлярлық карциноманы емдеу.Дж Гепарин.2012;56(4):908–943.doi:10.1016/j.jhep.2011.12.001
9. Чжан Г., Ха С.А., Ким ХК және т.б.Кіші гепатоцеллюлярлық карциномада пайдалы серологиялық маркерлер ретінде AFP және HCCR-1 біріктірілген талдау: перспективалық когортты зерттеу.Дис Марк.2012;32(4):265–271.doi: 10.3233/DMA-2011-0878
10. Чен С, Чен Н, Гао С және т.б.В гепатиті вирусымен байланысты бауыр ауруындағы микроРНҚ-125b плазмасының дифференциалды экспрессиясы және В гепатиті вирусымен туындаған гепатоцеллюлярлық карциноманың диагностикалық әлеуеті.Бауыр ауруларының резервуары.2017;47(4):312-320.doi: 10.1111/hepr.12739
11. Halle PR, Foster F., Kudo M. et al.Гепатоцеллюлярлық карциномадағы альфа-фетопротеиннің биологиясы және маңызы.Бауыр инт.2019;39(12):2214–2229.doi: 10.1111/liv.14223
12. Омата М, Ченг АЛ, Кокудо Н, т.б.Азия-Тынық мұхиты аймағындағы гепатоцеллюлярлық карциноманы емдеуге арналған клиникалық нұсқаулар: 2017 жылғы жаңарту.Бауыр ауруларының халықаралық ұйымы.2017;11(4):317–370.doi: 10.1007/s12072-017-9799-9
13. Сю Фэй, Чжан Ли, Хэ Вэй т.б.Қытайлық гепатоцеллюлярлық карциномамен ауыратын науқастарда PIVKA-II сарысуының жалғыз немесе AFP-мен біріктірілген диагностикалық мәні.Дис Марк.2021;2021:8868370.doi: 10.1155/2021/8868370
14. Durin L., Praradines A., Basset S. et al.Ұсақ жасушалы емес өкпе ісігі плазмалық емес гуморальды сұйықтық биопсиясы: ісікке жақынырақ!ұяшық.2020;9(11).doi: 10.3390/ұяшықтар9112486
15. Mader S, Pantel K. Сұйық биопсиясы: қазіргі жағдайы және болашақ перспективалары.Емдеу Oncol Res.2017;40(7-8):404-408.doi: 10.1159/000478018
16. Пальмиротта Р, Ловеро Д, Каффорио П және т.б.Сұйықтық негізіндегі қатерлі ісік биопсиясы: клиникалық онкологиядағы мультимодальды диагностикалық құрал.Adv Med Oncol.2018;10:1758835918794630.doi: 10.1177/1758835918794630
17. Mandel P., Metais P. Адам плазмасындағы нуклеин қышқылдары.CR Seances Soc Biol Fil.1948;142(3-4):241-243.
18. Мульер Ф, Чандрананда Д, Пискорц А.М., т.б.Айналымдағы ісік ДНҚ-сын фрагмент өлшемін талдау арқылы кеңейтілген анықтау.Ғылым медицинаны аударады.2018;10:466.doi: 10.1126/scitranslmed.aat4921
19. Underhill HR, Kitzman JO, Hellwig C. et al.Айналымдағы ісік ДНҚ фрагментінің ұзындығы.PLOS гендер.2016;12(7):e1006162.doi:10.1371/journal.pgen.1006162
20. Cheng F, Su L, Qian C. Айналмалы ісік ДНҚ: сұйықтық негізіндегі қатерлі ісік биопсиясындағы перспективалы биомаркер.мақсатты ісік.2016;7(30):48832–48841.doi: 10.18632/oncotarget.9453
21. Беттеговда С., Саузен М., Лири РДЖ және т.б.Адамның қатерлі ісіктерінің ерте және кеш кезеңдерінде айналымдағы ісік ДНҚ-сын анықтау.Ғылым медицинаны аударады.2014;6(224):224ра24.doi: 10.1126/scitranslmed.3007094
22. Mehes G. Қатты ісіктің мутациялы болжамды талдауы үшін сұйық биопсиясы: патологтың көзқарасы.J Биотехнология.2019;297:66-70.doi: 10.1016/j.jbiotec.2019.04.002
[PubMed] 23. Ленарц Л, Тувери С, Яценко Т, т.б.Айналымдағы плазмалық ДНҚ скринингі арқылы ісіктерді ерте анықтау: хайп немесе үміт?Бельгияның клиникалық құқығы.2020;75(1):9-1 doi:10.1080/17843286.2019.1671653
24. Нишида Н. Гепатит вирусының және адамның гепатокарциногенезіндегі ДНҚ метилденуіне қартаюдың әсері.Гистопатология.2010;25(5):647–654.doi: 10.14670/HH-25.647